Informace o projektu
Úloha kasein kinázy 1 v interakcích maligních B-buněk a jejich mikroprostředí

Projekt je zaměřen na studium interakcí buněk chronické lymfocytární leukémie (CLL) s jejich mikroprostředím v in vitro modelových systémech. Cílem je popsat, jakým způsobem jsou vybrané buněčné interakce závislé na aktivitě kasein kinázy 1 (CK1) a jejích isoforem delta, epsilon a alfa. Studovány budou takové interakce CLL buněk, které byly prokazatelně spojeny s rozvojem tohoto onemocnění či se vznikem rezistencí k terapii. Bude zaveden model imunologické synapse mezi B a T-lymfocyty a ko-kultivace CLL buněk s tzv. nurse-like buňkami. Dále v rámci projektu navážu na svou předchozí experimentální práci, ve které jsem se zabývala interakcí CLL buněk se stromálními buňkami kostní dřeně.
V první fázi projektu budou zavedeny jmenované modelové systémy a následně bude testován vliv inhibitorů specifických pro jednotlivé isoformy CK1 kináz na pozorované interakce. Využity budou komerčně dostupné inhibitory blokující selektivně CK1 epsilon (PF-4800567 a umbralisib - ve 3. fázi testování u CLL pacientů), delta/epsilon (PF-670462) nebo CK1 alfa (D4476), ale také látky produkované v rámci probíhajícího projektu na MU ve spolupráci s laboratoří doc. K. Parucha s cílem vytvoření selektivních CK1 inhibitorů pro klinické využití. Odhalení úlohy jednotlivých CK1 isoforem v rámci interakcí mezi CLL buňkami a buňkami jejich mikroprostředí je klíčové pro pochopení mechanismu terapeutického působení CK1 inhibitorů.
Předchozí studie prováděné v naší laboratoři prokázaly, že CK1 kinázy jsou vhodným terapeutickým cílem u CLL. Preklinické testování PF-670462 v in vitro, ale také in vivo v myším modelu CLL ukázalo, že blokování CK1 delta/epsilon dokáže rozvoj onemocnění zpomalit. Mechanismus jejich působení však nebyl kompletně popsán a není jasné, zda je pro dosažení terapeutického účinku nezbytná inhibice delta i epsilon isoforem a do jaké míry tento účinek ovlivní inhibice isoformy alfa, která v buňkách reguluje často velmi odlišné procesy. Cílem projektu tedy bude studium mechanismů ochranné funkce buněčného mikroprostředí CLL buněk. Popis efektu inhibice různých CK1 isoforem v jednotlivých in vitro modelech -zejména na dynamiku cytoskeletu B-lymfocytů a míru/schopnost aktivace CLL B-lymfocytů, ale také vlivu na interagující buňky.