VYUŽITÍ IONTOMĚNIČOVÉ KOLONY K HPLC DETEKCI POLYMORFNÍCH ÚSEKŮ DNA

• Autoři: EL KHALED Youssef; HLADILOVÁ Renáta; ŠIMEK Vladimír; ZVOLSKÝ Petr; MIKEŠ Vladimír; ŠERÝ Omar
• Rok publikování: 2003
• Druh: Článek ve sborníku
• Konference: VII. Pracovní setkání biochemiků a molekulárních biologů
• Fakulta / Pracoviště MU: Přírodovědecká fakulta
• Obor: Biochemie
• Klíčová slova: HPLC DNA detection polymorphism COMT alcoholism
• Popis: Metodika iontoměničové HPLC (kolona TSK-gel DEAE NPR) byla použita pro detekci polymorfizmu Val158Met genu pro COMT. Studovaný soubor zahrnoval 529 osob (251 kontrolních osob a 278 alkoholiků). DNA byla izolována z krve s využitím komerčně dostupného kitu UltraClean BloodSpin Kit (MoBio, USA). Pro genotypizaci byla použita metodika PCR s následnou restrikční analýzou enzymem Hsp92II (Jonsson et al., 1997). DNA produkt restrikčního štěpení byl detekován jednak na agarózovém gelu značeném ethidium bromidem, jednak pomocí metody HPLC. U kontrolních osob byla zjištěna frekvence alely M 0,49, u alkoholiků 0,47. Rozdíl mezi oběma skupinami osob nebyl statisticky významný (p = 0,25). V dalších analýzách nebyl objeven statisticky významný rozdíl v alelických a genotypových frekvencích ani po rozdělení souboru osob podle pohlaví. Z výsledků naší studie vyplývá, že polymorfizmus Val158Met genu pro COMT se samostatně nepodílí na dispozicích k závislosti na alkoholu, což ale nevylučuje jeho možnou účast na dispozicích k závislosti na alkoholu společně v kombinaci s dalšími polymorfizmy.

Související projekty

• Genetika závislostí: zjišťování vztahu polymorfizmů kandidátních genů k alkoholizmu
• Klinické a molekulárně-biologické koreláty hyperkinetické poruchy v dětském věku