Informace o publikaci
Stanovení celkové antioxidační aktivity (TRAP) v hemolymfě hmyzu
| Autoři | |
|---|---|
| Rok publikování | 2007 |
| Druh | Konferenční abstrakty |
| Fakulta / Pracoviště MU | |
| Citace | |
| Popis | Oxidační stres (nadprodukce volných reaktivních kyslíkových radikálů) je v posledních letech velmi sledovaným parametrem zvláště v humánní medicíně díky jeho vztahu k závažným onemocněním. Organismus se účinku volných radikálů brání přítomností některých enzymů a sloučenin schopných zhášet volné radikály (antioxidanty). Antioxidační kapacita krevní plazmy vypovídá o schopnosti bránit se působení volných radikálů. Velmi málo je známo o podobných mechanismech u jiných skupin živočichů, např. u hmyzu. Role volných radikálů v imunitních reakcích hmyzu zůstává stále sporná a hmyzí antioxidační mechanismy jsou předmětem intenzivního výzkumu. Cílem práce bylo stanovit celkovou antioxidační kapacitu hemolymfy některých zástupců hmyzu. Stanovení celkové antioxidační kapacity - TRAP (Total Radical-trapping Antioxidative Potential) probíhalo chemiluminiscenčně s využitím přesně definované produkce volných radikálů v měřeném vzorku a kalibrace stabilním analogem vitaminu E (Trolox). Vznikající radikály byly detekovány luminolem zesílenou chemiluminiscencí. Přidáním látky s antioxidačními vlastnostmi dojde na určitou dobu k úplnému vymizení signálu, tato doba je přímo úměrná TRAP testované látky. Byla použita čerstvě odebraná hemolymfa bource morušového (Bombyx mori), zavíječe voskového (Galleria mellonella), ruměnice pospolné (Pyrrhocoris apterus) a pro srovnání plazma lidské krve. Běžně používané antikoagulanty (fenylthiomočovina, aprotinin) výrazně ovlivňují stanovení TRAP, proto nebyly použity. Různá vývojová stádia B. mori vykazovala 5-11x vyšší TRAP hemolymfy než lidská plasma (995 +/- 132 nmol/ml). Také TRAP hemolymfy G. mellonella (5936 +/- 247nmol/ml) a P. apterus (435 +/- 469 nmol/ml) byla cca 4-6x vyšší. Sledování TRAP hemolymfy B. mori během vývoje dokazuje změny související s příjmem potravy a stádiem vývoje. Vysoká TRAP hemolymfy hmyzu může mít velký význam pro hmyzí imunitu tím, že zamezuje vzniku reaktivních kyslíkových metabolitů, které poškozují organismus. |