Project information
Imunochemické stanovení s použitím fluorescenčních nanočástic a optovláknového imunosensoru

Na modelovém stanovení albuminu v moči pomocí monoklonální protilátky budou porovnány bioanalytické parametry dosažitelné s různými typy fluorescenčních značek a pomocí různých způsobů detekce. Budou připraveny biokonjugáty využívající kvantové tečky, lanthanidové up-konvertující nanočástice a klasické organické fluorofory (fluorescein, tetramethylrhodamin). Biokonjugáty budou po purifikaci zobrazeny pomocí mikroskopie atomárních sil (AFM), stanoví se jejich fluorescenční vlastnosti a budou studovány jejich afinitní interakce při tvorbě imunokomplexu pomocí povrchové plasmonové rezonance (SPR, Biacore nebo BioNavis) a pomocí vyvíjeného optovláknového imunosenzoru využivajícího excitaci pomocí evanescentní vlny. U optovláknového senzoru budou vyzkoušeny různé geometrické konfigurace a úpravy povrchu senzorické části pro optimální záchyt fluorescenčního signálu. Homogenní imunostanovení bude otestováno pomocí dvou flouroforů, kdy jeden fluorofor svým zářením excituje druhý pomocí FRET jevu (Försterův rezonanční přenos energie). Budou vyvinuta fluorescenční imunostanovení v mikrodestičkovém formátu s vyhodnocením na systému Synergy a otestována pro měření mikroalbuminurie. Nejcitlivější varianta pak bude pokusně převedena i do formátu jednorázového papírkového stanovení. Vyvinuté systémy budou srovnány se stanovením pomocí optovláknového imunosenzoru v reálném vzorku moči a validovány standartním klinickým testem.
Projekt bude výsledkem spolupráce dvou diplomantů - Jakub Věžník (konstrukce, optimalizace optovláknového senzoru) Patrik Gereg (využití fluoresncečních nanočástic).