Informace o publikaci
Studium protein-proteinových interakcí in vivo: Y2H, BiFC, MeRA
| Autoři | |
|---|---|
| Rok publikování | 2009 |
| Druh | Vyžádané přednášky |
| Fakulta / Pracoviště MU | |
| Citace | |
| Popis | Schopnost interagovat s dalšími proteiny je jednou ze základních charakteristik proteinů. K rychlému vyhledání interakčních partnerů rostlinných proteinů používáme několik metod pro in vivo analýzu proteinových interakcí v kvasinkách, nebo v transientně transoformovaných listech tabáku Nicotiana benthamiana. Kvasinkový dvouhybridní systém (Yeast two-hybrid system, Y2H) je klasickou metodou pro analýzu proteinových interakcí a je vhodné jej použít pro získání prvních interakčních informací. Výsledky je proto nutné ověřit jinými nezávislými metodami. Jednou z takových metod je bimolekulární fluorescenční komplementace (Bimolecular Fluorescence Complementation, BiFC). Další metodou vhodnou pro analýzu interakcí mezi membránovým proteinem a cytosolikcými proteiny zprostředkované vazby na membránu (Membrane Recruitment Assay, MeRA). Pro konstrukci rekombinantní DNA používáme ve všech třech popsaných případech klonování prostřednictvím Gateway technologie. |
| Související projekty: |