Project information
In situ visualization of ATPase Inhibitory Factor 1 (If1) in mitochondrial ultrastructure by high-resolution cryo-electron tomography

ATP syntáza je primárním zdrojem buněčného ATP, ale kromě toho také tvaruje mitochondriální kristy a je vstupní branou buněčné smrti. Jejím často diskutovaným, ale stále neprozkoumaným regulátorem je inhibiční faktor 1 (ATPIF1), který má zásadní roli v kardioprotekci, kancerogenezi nebo regulaci sekrece inzulínu. V tomto projektu použijeme nejmodernější kryoelektronovou a superrozlišovací mikroskopii k detailnímu popsání jeho interakce s ATP syntázou in situ v mitochondriální vnitřní membráně β-buněk pankreatu při nadbytku živin, hladovění nebo hypoxii. Pomocí cílené mutageneze budeme studovat vliv posttranslačních modifikací ATPIF1 na interakci s ATP syntázou a submitochondriální lokalizaci a zároveň budeme identifikovat relevantní signální dráhy. Nakonec budeme zkoumat potenciální interakci ATPIF1 s proteiny rodiny BCL2 za podmínek vedoucích k apoptóze. Cílem projektu je objasnit mechanismus působení ATPIF1, specifikovat podmínky, za kterých se váže na ATP syntázu, a popsat jeho úlohu při regulaci buněčné smrti pankreatických beta-buněk.