Publication details

Studium změn v plexus choroideus po intraperitoneální aplikaci paclitaxelu

Title in English Study of changes in the choroid plexus after intraperitoneal administration of paclitaxel
Authors

SLANÍKOVÁ Adriana LUJC Michael SINAI CACODCAR Rahul Sanjiva

Year of publication 2016
Type Conference abstract
MU Faculty or unit

Faculty of Medicine

Citation
Description Úvod: Paclitaxel je cytostatikum z třídy taxanů používané při léčbě solidních tumorů. Jedním z jeho vedlejších účinků je rozvoj periferní neuropatie. Současně dochází k buněčným a molekulárním změnám ve vyšších etážích centrální nervové soustavy. Jednou z cest šíření zánětové reakce může být hemato likvorová bariéra v plexus choroideus (CP) mozkových komor. Předpokládáme, že paclitaxel může působit přímo na buňky CP nebo nepřímo uvolněním signálních molekul. Cílem naší práce bylo studium buněčných a molekulárních změn v CP po intraperitoneální aplikaci paclitaxelu. Metody: Experimenty byly provedeny na 15 potkanech linie Wistar (samci, 250–300 g). Intaktní zvířata bez podání jakékoliv látky (naivní; n = 5) a skupina zvířat po podání vehikula (n = 5) tvořila referenční soubor. Experimentální skupině zvířat (n = 5) byl ve čtyřech dávkách intraperitoneálně aplikován paclitaxel v kumulativní dávce 8 mg/kg. Kontrolním zvířatům bylo ve čtyřech dávkách podáno vehikulum tvořené alkoholem a kremoforem. Zvířata experimentální a kontrolní skupiny byla usmrcena 7 dnů po poslední dávce inhalací CO2, perfundována přes aortu fyziologickým roztokem s heparinem a následně Zamboniho fixačním roztokem. Odebrané mozky zvířat byly ponechány tři dny v Zamboniho fixačním roztoku. Po oplachování v 10% sacharóze ve fosfátovém pufru byly zhotoveny kryostatové koronální řezy o tloušťce 20 µm v úrovni třetí a laterální komory. Na řezech mozkem byly imunohistochemicky detekovány aktivované (ED1) a rezidentní (ED2) makrofágy a dendritické buňky (OX-42). Proliferační aktivita buněk CP byla sledována imunohistochemicky protilátkou proti antigenu Ki67. Toll-like receptor 9 (TLR-9) byl detekován nepřímou imunohistochemickou reakcí. Imunohistochemické reakce byly vyhodnoceny ve fluorescenčním mikroskopu a počet ED1+, ED2+, OX42+, Ki67+ buněk a intenzita TLR-9 imunofluorescence byly kvantifikovány analýzou obrazu a statisticky zpracovány. Výsledky: Po intraperitoneální aplikaci paclitaxelu nebo vehikula došlo v CP ke statisticky signifikantnímu zvýšení počtu aktivovaných (ED1+) a rezidentních (ED2+) makrofágů ve srovnání s intaktními potkany. Statisticky významný nárůst počtu ED1+ i ED2+ makrofágů byl zjištěn v CP zvířat po aplikaci paclitaxelu ve srovnání s aplikací vehikula. Při srovnání kontrolních skupin a experimentálních zvířat nedošlo k významné změně v počtu OX-42+ buněk v CP. Imunohistochemickou detekcí byla přítomnost TLR-9 prokázána na povrchu kuboidních buněk CP. Ve srovnání s intaktními zvířaty bylo v CP zvířat po podání paclitaxelu nebo jen vehikula prokázáno statisticky významné zvýšení TLR-9 imunofluorescence. Aplikace paclitaxelu však vyvolala statisticky významné zvýšení TLR-9 imunofluorescence ve srovnání se zvířaty, kterým bylo podáno pouze vehikulum. Ve srovnání s intaktními zvířaty i zvířaty po podání vehikula byla po aplikaci paclitaxelu prokázána zvýšená proliferace buněk. Všechny takto fenotypizované buňky byly pozorovány v CP převážně v epiplexální pozici. Závěr: Intraperitoneální aplikace paclitaxelu vyvolala zvýšení počtu rezidentních i aktivovaných makrofágů v CP potkanů. Tyto buněčné změny mohou souviset se zvýšenou expresí TLR-9 v CP jednotlivých skupin po podání paclitaxelu. Je známo, že TLR-9 je specifickým receptorem pro molekuly, které se uvolňují z poškozené tkáně včetně poškozených axonů. Po aplikaci paclitaxelu dochází k uvolnění ligandů TLR-9 z poškozených axonů periferních nervů. Předpokládáme, že se tyto molekuly dostávají do krve a touto cestou přes TLR-9 mohou ovlivnit buněčné složení CP a prostupnost hemato-likvorové bariéry.
Related projects:

You are running an old browser version. We recommend updating your browser to its latest version.

More info