Informace o projektu

Využití kapilární elektroforézy pro studium metabolismu léčiv

Kód projektu
GA203/06/0047
Období řešení
1/2006 - 12/2008
Investor/Program
Grantová agentura ČR
Programový rámec / typ projektu
Standardní projekty
Fakulta/Pracoviště MU
Přírodovědecká fakulta
Klíčová slova
kapilární elektroforéza, xenobiotika, metabolismus

Cílem tohoto projektu je zdokonalit a rozšířit aplikační množnosti kapilární elektroforézy, speciálně její modifikace metody EMMA (Electrophoretically Mediated MicroAnalysis) pro stanovení aktivity a studium membránově vázaných enzymů. Konkrétně bude studie zaměřena na skupinu důležitých detoxikačních enzymů – cytochromy P450, které se v organismu podílí mimo jiné na metabolismu léčiv, jejich detoxikaci, případně aktivaci. Hlavní pozornost bude zaměřena na možnost kombinace metody EMMA s technikou částečného plnění kapiláry, při které je část kapiláry naplněna pufrem optimálním pro příslušnou enzymovou reakci, zatímco zbytek kapiláry základním elektrolytem optimálním pro separaci substrátů a především produktů příslušné enzymové reakce. Tím by měla být odstraněna hlavní limitace metody EMMA, kterou je právě potřeba stejného pufru – základního elektrolytu jak pro enzymovou reakci, tak pro vlastní separaci. Uvedená metoda bude využita pro stanovení aktivity a studium různých izoenzymů cytochromů P450 a to za použití různých módů kapilární elektroforézy – kapilární elektroforézy ve volné kapiláře, micelární elektrokinetické kapilární chromatografie, případně chirální kapilární elektroforézy. Bude přitom použita klasická UV-VIS detekce s diodovým polem, pro identifikaci analytů bude testována MS v off-line uspořádání. Jako zdroj cytochromů P450 bude využita mikrosomální frakce, v případě dostupnosti rekombinantní formy cytochromů P450. Jako substráty bude testována celá řada důležitých farmakologických substancí. Hlavní výhodou této metody je malá spotřeba chemikálií, což je důležité především v případě enzymových preparátů, substrátů, případně inhibitorů. Automatizace všech kroků vlastního stanovení navíc eliminuje možné experimentální chyby.

Publikace

2009

Integration of on-line protein digestion by trypsin in capillary electrophoresis by means of electrophoretically mediated microanalysis

ZEISBERGEROVÁ Marta — ADÁMKOVÁ Andrea — GLATZ Zdeněk

2008

Application of EMMA methodology for on-capillary protein digestion in proteomic research

ZEISBERGEROVÁ Marta — KLIMÍČKOVÁ Andrea — GLATZ Zdeněk

Application of Micellar Electrokinetic Capillary Chromatography for Evaluation of Inhibitory Effects on Cytochrome P450 Reaction

KONEČNÝ Jiří — MIČÍKOVÁ Ivana — ŘEMÍNEK RomanGLATZ Zdeněk

Capillary Microreaction Method Development for Drug Discovery Support

ZEISBERGEROVÁ Marta — KONEČNÝ Jiří — GLATZ Zdeněk — HOOGMARTENS Jos — VAN SCHEPDAEL Ann

Comparison of electrophoretic methods for dextromethorphan metabolites separation obtained by in vitro incubation with microsomes

ZEISBERGEROVÁ Marta — KONEČNÝ Jiří — GLATZ Zdeněk — HOOGMARTENS Jos — VAN SCHEPDAEL Ann

Comparison of electrophoretic methods for dextromethorphan metabolites separation prepared by in vitro incubations

ZEISBERGEROVÁ Marta — KONEČNÝ Jiří — GLATZ Zdeněk

Electrophoretically mediated microanalysis as a tool in proteomic research as a tool in proteomic research

ZEISBERGEROVÁ Marta — KLIMÍČKOVÁ Andrea — GLATZ Zdeněk

HPLC a ELISA stanovení asymetrického dimethylargininu u akutního infarktu myokardu

KLEPÁRNÍK Martin — PAŘENICA Jiří

Microreaction in CE for drug metabolism studies (Lecture)

ZEISBERGEROVÁ Marta — KONEČNÝ Jiří — GLATZ Zdeněk — HOOGMARTENS Jos — VAN SCHEPDAEL Ann

On-capillary microreaction electrophoretic technique utilizing microsomes as an enzymatic system in drug metabolism studies

ZEISBERGEROVÁ Marta — KONEČNÝ Jiří — GLATZ Zdeněk — HOOGMARTENS Jos — VAN SCHEPDAEL Ann

Předchozí 1 2 3 4 Další

Používáte starou verzi internetového prohlížeče. Doporučujeme aktualizovat Váš prohlížeč na nejnovější verzi.

Další info